M.dunni(CloneIII8C) 小鼠皮膚成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào)：CL-146m

細(xì)胞特性

形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶（常溫運(yùn)輸）/ 1mL凍存管包裝（干冰運(yùn)輸）

用途：僅供科研使用

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

收貨須知

收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常，請(qǐng)?jiān)?/span> 24 小時(shí)內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服，逾期視為收貨良好；凍存管形式，收貨后及時(shí)置于-80℃冰箱保存，若長(zhǎng)時(shí)間不使用，應(yīng)過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮保藏；T25 形式，收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng) 4h，然后再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作。復(fù)蘇時(shí)每管一次用完不得留存，復(fù)蘇后傳一代，即可正常使用。請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明操作，否則造成細(xì)胞失活等情形，不予提供補(bǔ)發(fā)服務(wù) 。

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

①　新制 100mm 平皿 1 個(gè)，含 12mL 上述培養(yǎng)液；

②　凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；

③　用無(wú)菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時(shí)針搖勻；

④　放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過(guò)夜換液，2-4 天長(zhǎng)滿(mǎn)。

（二）細(xì)胞傳代/凍存

將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，吸除大部分胰酶，留約 0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約 0.5min 取出。傳代用 6mL CM5-1 培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分 3~6 皿培養(yǎng)；凍存則用 3mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為 3 支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。

注意事項(xiàng)：

①　所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

②　建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿(mǎn)液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。