OVCAR-8/ADR 人卵巢癌腺癌阿霉素耐藥細胞

產(chǎn)品編號：CL-591h

細胞介紹

OVCAR-8/ADR為由OVCAR-8細胞構(gòu)建的耐ADR藥物細胞株。

細胞特性

來源：高級別卵巢漿液性腺癌  女  64歲

形態(tài)：上皮樣   貼壁生長

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用

細胞運輸、保存及注意事項

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）ADR藥物的配制及保存

建議將ADR藥物配制成1mg/mL的母液，即使用10mL PBS溶液溶解10mg ADR藥物，使其完全溶解后，使用0.22um濾器過濾除菌。

注意：可根據(jù)用量配置藥物，并將藥物分裝保存，避免反復凍融導致藥物失效。溶解后的Taxol，4℃保存1周，-20℃保存1個月，-80℃保存6個月。

2）凍存液的配制

90%優(yōu)質(zhì)胎牛血清+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。（凍存液中不含藥物）

3）完全培養(yǎng)基的配制（推薦使用CM-591h）

細胞復蘇、傳代、凍存操作

（一）細胞復蘇

①　新制 100mm 平皿 1個，含 12mL 上述培養(yǎng)液；

②　凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復蘇；

③　用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；

④　放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。

注意：建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）細胞傳代

將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用6mL培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可1:2傳代。

（三）細胞凍存:

凍存則用3mL凍存液（90% FBS+ 10% DMSO）終止消化，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。

注意事項

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。