

其它名稱: C1498
產(chǎn)品編號(hào): CL-191m
價(jià)格: ¥2800
C1498 小鼠白血病細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào):CL-191m
細(xì)胞特性
形態(tài):淋巴母細(xì)胞,懸浮生長(zhǎng)
含量:>1x106cells
規(guī)格:T25瓶x1(常溫運(yùn)輸)/ 2mL凍存管x2(干冰運(yùn)輸)
用途:僅供科研使用
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
完全培養(yǎng)基 | 90%1640 + 10%FBS |
培養(yǎng)條件 | 37℃,5%CO2 |
凍存液 | 50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40%FBS + 10%DMSO |
收貨須知
收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常,請(qǐng)?jiān)?/span>24小時(shí)內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服,逾期視為收貨良好!
凍存管形式:收貨后及時(shí)置于-80℃冰箱保存,若長(zhǎng)時(shí)間不使用,應(yīng)過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮。
T25形式:收貨后于培養(yǎng)箱中靜置2-3h,再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作。在無(wú)菌條件下,將原瓶培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移到離心管中,1000-1200rpm/min離心5~10min后重懸細(xì)胞,轉(zhuǎn)移懸浮細(xì)胞到新的T25瓶中,補(bǔ)加完全培養(yǎng)基到10mL,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明操作,否則造成細(xì)胞失活等情形,不予提供補(bǔ)發(fā)服務(wù)。
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作
(一)細(xì)胞復(fù)蘇
① 凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速?zèng)]入 37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以 1 min內(nèi)全部溶解為宜;
② 在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,棄去上清液,用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;
③ 然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱中豎立培養(yǎng)。
(二)細(xì)胞傳代
① 離心法:收集細(xì)胞,1000rpm條件下離心5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2 的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。
② 半量換液法:培養(yǎng)瓶靜置5-10分鐘后,將上清培養(yǎng)基輕輕吸走一半,剩余留有細(xì)胞沉淀的培養(yǎng)基重懸混勻,細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。
③ 注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到大于2×106個(gè)/mL時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。
注意事項(xiàng):
① 細(xì)胞具有密度依賴性,首次傳代(密度達(dá)到 80%),建議 1:2 傳代(保持細(xì)胞密度),且優(yōu)先在 T25 瓶中。
② 密封培養(yǎng)瓶的話,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松。
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