NHEK正常人表皮角質(zhì)形成細胞

產(chǎn)品編號：CL-658h

細胞特性

形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶x1（常溫運輸）/ 2mL凍存管x2支（干冰運輸）

用途：僅供科研使用

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備

收貨須知

收貨當天發(fā)現(xiàn)異常，請在 24 小時內(nèi)及時聯(lián)系客服，逾期視為收貨良好；

凍存管形式：收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若長時間不使用，應(yīng)過夜轉(zhuǎn)移至液氮。復蘇時每管一次用完不得留存；

T25形式：T25 形式，收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng) 4h，然后再對細胞進行常規(guī)操作。復蘇時每管一次用完不得留存，復蘇后傳一代，即可正常使用。請嚴格按照本說明操作，否則造成細胞失活等情形，不予提供補發(fā)服務(wù)。

細胞復蘇、傳代、凍存操作

（一）細胞復蘇

①　新制 100mm 平皿 1 個，含 12mL 上述培養(yǎng)液；

②　凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復蘇；

③　用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；

④　放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，7-9 天長滿。

（二）細胞傳代

將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，吸除大部分胰酶，留約 0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約 3.5min 取出。傳代用 6mL CM8-1 培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分 3~6 皿培養(yǎng)；凍存則用 3mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為 3 支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。