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松原L1210 小鼠白血病細(xì)胞

其它名稱: L1210; L 1210; L-1210; Leukemic 1210; Leukemia 1210; Leukemia L1210

產(chǎn)品編號: CL-178m

價格: ¥1200

規(guī)格:
1×10?cells
數(shù)量: - +

詳細(xì)介紹

AE-1 小鼠雜交瘤細(xì)胞抗AChE

產(chǎn)品編號:CL-178m

細(xì)胞特性

含量:>1x106cells;

生長特性:懸浮生長;

細(xì)胞形態(tài):懸浮,淋巴母細(xì)胞,圓形;

規(guī)格:T25瓶或者2mL凍存管包裝;

用途:僅供科研使用。

細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項


復(fù)蘇細(xì)胞

凍存細(xì)胞

包裝

充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

2mL凍存管

運(yùn)輸條件

常溫

干冰

保存方式

75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱

-80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇

注意事項

① 收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們;

② 請在45X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照,10X20X2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù);

③ 半貼細(xì)胞或貼壁不牢(懸?。┘?xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況,若細(xì)胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細(xì)胞生長70%-90%對細(xì)胞進(jìn)行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收

④ 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代。

 培養(yǎng)條件

完全培養(yǎng)基

DMEM-H完全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣;

凍存液

90%FBS+10%DMSO

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

(一)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

① 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,1000rpm/min離心3~5min,棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

② 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)70%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意:建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩,避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

(二)該細(xì)胞輕微貼壁和懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,傳代可以參考以下方法:

① 收集:將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細(xì)胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。由于細(xì)胞貼壁不牢PBS潤洗后細(xì)胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

② 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

③ 將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

(三)細(xì)胞凍存

① 細(xì)胞凍存時,步驟同細(xì)胞傳代的①~④,細(xì)胞計數(shù)后,加入配制好的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,按照1×106 ~ 1×107個細(xì)胞/mL分配到一個凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

② 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80℃冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項:

所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。



服務(wù)熱線:400-027-5700

地址:湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷三路778號

          自貿(mào)生物創(chuàng)新港9層

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