Jeko-1 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

產(chǎn)品編號：CL-633h

細(xì)胞介紹

一位套細(xì)胞淋巴瘤患者的巨細(xì)胞變種顯示白血病轉(zhuǎn)變，從其外周血單核細(xì)胞出發(fā)建立了MCL細(xì)胞株JeKo-1。 JeKo-1細(xì)胞EB病毒陰性，并表達(dá)一種B細(xì)胞表型的IgM。 細(xì)胞過表達(dá)cyclin D1, Bcl-2, c-Myc 及 Rb 蛋白。 Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR證實(shí)。 JeKo-１細(xì)胞在SCID小鼠中高成瘤。 

細(xì)胞特性

來源：外周血 組織： 套細(xì)胞淋巴瘤

形態(tài)：淋巴母細(xì)胞，懸浮生長

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用

細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

注意：建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）細(xì)胞傳代（建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1：2比例傳代）

①　待細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

②　懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài)，一般情況下細(xì)胞密度維持在1×10⁵~1×10⁶個(gè)/mL（不同細(xì)胞對密度要求不同）可以維持細(xì)胞的正常生長。

③　如需分瓶可以將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min離心5min，棄去上清液。向細(xì)胞沉淀中加入1~2mL完全培養(yǎng)基重懸混勻細(xì)胞，將細(xì)胞懸液按1：1比例均勻鋪于2個(gè)新的培養(yǎng)瓶/皿中，添加6~8mL完全培養(yǎng)基，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

（三）細(xì)胞凍存

①　細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度，一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個(gè)活細(xì)胞/ml。

②　1000rpm離心3-5min，去掉上清，用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

③　將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng)：

所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。