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其它名稱： XC
產(chǎn)品編號(hào)： CL-053r
價(jià)格： ￥3200
XC 大鼠 Wistar 肉瘤細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào)：CL-053r
細(xì)胞特性
含量：>1x106cells；
生長特性：貼壁生長；
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣細(xì)胞，圓形，多角形
規(guī)格：T25瓶或者2mL凍存管包裝；
用途：僅供科研使用。
細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)
復(fù)蘇細(xì)胞 | 凍存細(xì)胞 | |
包裝 | 充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 2mL凍存管 |
運(yùn)輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇 |
注意事項(xiàng) | ① 收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們； ② 請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照，10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)； ③ 貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中），加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收； ④ 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。 | |
培養(yǎng)條件
完全培養(yǎng)基 | EMEM完全培養(yǎng)基：90%EMEM+10%FBS |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
凍存液 | 3mL凍存液（90% FBS+ 10% DMSO） |
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作
（一）細(xì)胞復(fù)蘇
① 新制 100mm 平皿 1個(gè)，含 12mL 上述培養(yǎng)液；
② 凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；
③ 用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時(shí)針搖勻；
④ 放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。
注意：建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
（二）細(xì)胞傳代
將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用6mL培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可1:2傳代。
（三）細(xì)胞凍存:
凍存則用3mL凍存液（90% FBS+ 10% DMSO）終止消化，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
注意事項(xiàng)
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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