

其它名稱: PC-3M 2B4; PC3M-2B4; 2B4-L; 2B4
產(chǎn)品編號(hào): CL-539h
價(jià)格: ¥3500
PC-3M-2B4人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào):CL-539h
細(xì)胞介紹
PC-3M-2B4細(xì)胞是一株由母系細(xì)胞PC-3M經(jīng)單細(xì)胞克隆法分離鑒定的低轉(zhuǎn)移亞系;PC-3M-2B4細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤率87.5%,不轉(zhuǎn)移。
細(xì)胞特性
來源:前列腺癌
形態(tài):上皮細(xì)胞樣,多角形,貼壁生長(zhǎng)
含量:>1x10?cells
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
用途:僅供科研使用
細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)
復(fù)蘇細(xì)胞 | 凍存細(xì)胞 | |
包裝 | 充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運(yùn)輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇 |
注意事項(xiàng) | ① 收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們; ② 請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù); ③ 貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收; ④ 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶 1:2傳代。 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
完全培養(yǎng)基 | 1640 培養(yǎng)基 + 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10% |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37℃;培養(yǎng)箱濕度為70%-80% |
凍存液 | 50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO |
注意事項(xiàng) | 傳代凍存時(shí)請(qǐng)收集懸浮細(xì)胞。 |
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作
(一)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,1000rpm/min離心3~5min,棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
注意:建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩,避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
(二)細(xì)胞傳代(建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1:2比例傳代)
① 待細(xì)胞密度達(dá)到70%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
② 該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞,該細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟替代胰酶來對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理。用無菌細(xì)胞刮鏟刮拭細(xì)胞附著培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,收集細(xì)胞后離心去上清,重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。收貨后第一次傳代1:2進(jìn)行,后續(xù)可以根據(jù)實(shí)際的情況以1:2~1:4的比例進(jìn)行傳代
(三)細(xì)胞凍存
① 細(xì)胞凍存時(shí),步驟同細(xì)胞傳代的①~④,細(xì)胞計(jì)數(shù)后,加入配制好的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,按照1×106 ~ 1×107個(gè)細(xì)胞/mL分配到一個(gè)凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
② 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80℃冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項(xiàng):
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
地址:湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷三路778號(hào)
自貿(mào)生物創(chuàng)新港9層
郵箱:service@51cells.cn
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