規(guī)格： 100mL            

儲存條件：2 ~ 8 ℃

產品簡介

iPSC消化液可以應用于非飼養(yǎng)層依賴的iPSC傳代，該工作液屬于非酶類溫和消化液，對細胞損傷小且消化時間適中便于操作，是一種已被普遍使用的消化液，可與iPSC培養(yǎng)基搭配使用。

操作說明

1. 將iPSC完全培養(yǎng)基取出并平衡至室溫，取出包被過iPSC鋪底工作液的培養(yǎng)皿/瓶，吸去包被液并加入適量完全培養(yǎng)基，置于5% CO?的37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中。

2. 吸走待傳代細胞培養(yǎng)皿/瓶中的iPS完全培養(yǎng)基，并且加入無鈣鎂的PBS溶液洗一次。

3. 加入iPSC消化液使之完全覆蓋皿/瓶底。

4. 室溫放置5 ~ 8 min或37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中孵育3 ~ 5 min，顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離皿/瓶底，克隆內部大部分細胞間出現(xiàn)間隙但尚未相互分離，肉眼觀察到細胞集落變得不透明且發(fā)白，表明細胞消化時間理想。

5. 吸去iPSC消化液，即刻加入新鮮的iPSC完全培養(yǎng)基，用移液器扇形吹打培養(yǎng)皿/瓶底，使皿/瓶底貼附的干細胞集落脫落，輕柔緩慢吹吸混勻。

注：吹吸的力度要輕柔，吹打脫落和吹吸混勻的次數(shù)總共不超過10次為宜。吹打過度導致大量單細胞出現(xiàn)是造成細胞分化或死亡的重要原因。

  注：如有少量細胞無法從皿底脫落，屬于正?，F(xiàn)象。如有大量細胞無法從皿底脫落，需延長消化時間。

6. 顯微鏡下觀察細胞呈4 ~ 20個細胞大小的團塊，水平十字搖勻。

7. 將細胞置于5% CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

8. 每天換液直至達到可以傳代的標準。