當前位置：
鄂公網安備 42018502005592號
微信咨詢
S-180 小鼠腹水瘤細胞
產品編號：CL-174m
細胞特性
含量：>1x106cells
形態(tài)：淋巴母細胞樣，圓形，邊緣不規(guī)則，單個細胞，少數聚團
生長特性：半貼壁半懸浮
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
用途：僅供科研使用
細胞運輸、保存及注意事項
復蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇 |
注意事項 | ① 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們； ② 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照，10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據； ③ 半貼細胞或貼壁不牢（懸浮）細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代，傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收； ④ 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶 1：2傳代。 | |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
完全培養(yǎng)基 | DMEM-H完全培養(yǎng)基：90%DMEM-H+10%FBS |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣 |
凍存液 | 6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO） |
細胞復蘇、傳代、凍存操作
（一）細胞復蘇
① 新制 100mm 平皿 1個，含 12mL 上述培養(yǎng)液；
② 凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復蘇；
③ 用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；
④ 放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。
注意：建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
（二）細胞傳代
將培養(yǎng)液（含懸浮細胞）吸至離心管中，(110g，3min)離心，收集細胞；皿中細胞用 PBS 清洗兩遍后，加入 6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約 0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約 1min 取出。①傳代：將以上皿細胞用 10mL CM1-1 培養(yǎng)液終止消化，離心管細胞用 2mLCM1-1 培養(yǎng)液重懸，共計 12mL 培養(yǎng)液一并吸至皿里混勻，分 3~6 皿培養(yǎng)。
（三）細胞凍存:
凍存則用6mL凍存液（90% FBS+ 10% DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
注意事項
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
暫無評價信息！