當(dāng)前位置：
鄂公網(wǎng)安備 42018502005592號(hào)
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其它名稱： BB7.1
產(chǎn)品編號(hào)： CL-156m
價(jià)格： ￥3000
BB7.1小鼠 B 淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品編號(hào)：CL-156m
細(xì)胞特性
含量：>1x106cells；
生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣，圓形，單個(gè)細(xì)胞，背景干凈
規(guī)格：T25瓶或者2mL凍存管包裝；
用途：僅供科研使用。
細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)
復(fù)蘇細(xì)胞 | 凍存細(xì)胞 | |
包裝 | 充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運(yùn)輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇 |
注意事項(xiàng) | ① 收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們； ② 請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照，10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)； ③ 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）； ④ 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。 | |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
完全培養(yǎng)基 | 90%RPMI-1640+10%FBS RPMI-1640：1640 培養(yǎng)液，含谷氨酰胺 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃；培養(yǎng)箱濕度為70%-80% |
凍存液 | 90%血清 + 10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配 |
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作
（一）細(xì)胞復(fù)蘇
① 新制 100mm 平皿 1個(gè)，含 12mL 上述培養(yǎng)液；
② 凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；
③ 用無(wú)菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時(shí)針搖勻；
④ 放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過(guò)夜換液，5-7天長(zhǎng)滿。
注意：建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
（二）細(xì)胞傳代
將培養(yǎng)好的懸浮細(xì)胞輕輕吹打均勻，分配至 3~6 個(gè)新鮮培養(yǎng)液皿中，輕輕搖勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)；
（三）細(xì)胞凍存:
將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，(110g，3min)離心，離心完成后用 3mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸細(xì)胞，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
注意事項(xiàng)
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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