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產(chǎn)品中心

大興安嶺Mono-Mac-6人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

其它名稱: MONO-MAC-6; Mono-mac-6; MONO-MAC 6; Mono Mac 6; Mono Mac6; MonoMac 6; MonoMac6; MONOMAC6; MM6

產(chǎn)品編號(hào): CL-240h

價(jià)格: ¥1800

規(guī)格:
1x10?cells
數(shù)量: - +

詳細(xì)介紹

Mono-Mac-6人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào):CL-240h

一、細(xì)胞介紹

Mono-Mac-6細(xì)胞是1985年從一名64歲男性的外周血中建立的,該男性患有復(fù)發(fā)性急性單核細(xì)胞白血病 (AML FAB M5),在骨髓增生后出現(xiàn)。

二、細(xì)胞特性

來(lái)急性單核細(xì)胞白血病,單核細(xì)胞

態(tài)圓形,懸浮生長(zhǎng)

>1x10?cells

規(guī)T25x1常溫運(yùn)輸/ 含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管x2干冰運(yùn)輸

:本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用,不可用于動(dòng)物或人類治療或診斷用途

三、完全培養(yǎng)基及凍存液配制

1) 該細(xì)胞完全培養(yǎng)基為:RPMI-1640+10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清+1%雙抗+1% MEM NEAA非必需氨基酸+1% Sodium Pyruvate丙酮酸鈉+10 μg/mL牛胰島素

注意:該細(xì)胞對(duì)胎牛血清品質(zhì)比較敏感,需要用到優(yōu)質(zhì)胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)出現(xiàn)緩慢時(shí),建議提高血清濃度到20%,或者更換更優(yōu)質(zhì)的胎牛血清來(lái)培養(yǎng)。

2) 培養(yǎng)環(huán)境37℃;95% Air,5% CO?;濕度為70%-80%

3) 凍存液:90%血清+10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配

四、收貨注意事項(xiàng)

1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液體溢出及細(xì)胞有污染,凍存細(xì)胞若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,請(qǐng)拍照后及時(shí)與我們聯(lián)系。

2) 75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于培養(yǎng)箱置約2-3h。在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)

3) 對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞:靜置后,抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞,1000rpm離心5分鐘,棄去上清,重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。


細(xì)胞培養(yǎng)操作說(shuō)明

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1. 含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管快放入37℃水浴中解凍,輕輕搖晃加速溶解,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%酒精擦拭凍存管外壁。

2. 將凍存管內(nèi)容物加入到含5mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,1000rpm離心5min。

3. 棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4. 第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

注意:在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和佩戴防護(hù)面罩,避免凍存管爆炸造成人員傷害。

二、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代

懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞,可以通過(guò)向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來(lái)維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×10?~1×10?個(gè)/mL(不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同)可以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。

如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

三、細(xì)胞凍存

收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。步驟如下

1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/mL。

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清,用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,按每1mL凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/mL分配到一個(gè)凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細(xì)胞放入程序降溫盒中,-80冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng):

所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全柜內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。


服務(wù)熱線:400-027-5700

地址:湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)光谷三路778號(hào)

          自貿(mào)生物創(chuàng)新港9層

郵箱:service@51cells.cn

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