P3HR-1 人B淋巴瘤細(xì)胞

產(chǎn)品編號：CL-566h

一、細(xì)胞特性

形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣，圓形

生長特性：懸浮生長

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶x1（常溫運輸）/2mL凍存管x2（干冰運輸）

用途：本產(chǎn)品僅供實驗室研究使用，不可用于動物或人類治療或診斷用途

二、完全培養(yǎng)基及凍存液配制

1) 該細(xì)胞完全培養(yǎng)基為：80%RPMI-1640+20%熱滅活FBS

2) 培養(yǎng)條件：氣相：5%CO?+95%AIR；溫度：37℃；培養(yǎng)箱濕度：70%-80%。

3) 凍存液：90%血清+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

三、收貨須知

收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常，請在 24 小時內(nèi)及時聯(lián)系客服，逾期視為收貨良好！

凍存管形式：收貨后及時置于-80℃冰箱保存，若長時間不使用，應(yīng)過夜轉(zhuǎn)移至液氮。

T25 形式：在無菌條件下，將培養(yǎng)瓶的全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到離心管中，在125 x g轉(zhuǎn)速下離心 5-10 min 后重懸細(xì)胞，轉(zhuǎn)移懸浮細(xì)胞到新的 T25 瓶中，補加完全培養(yǎng)基到 10mL，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。請嚴(yán)格按照本說明操作，否則造成細(xì)胞失活等情形，不予提供補發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟

（一）細(xì)胞復(fù)蘇

① 凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速沒入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內(nèi)全部溶解為宜；

② 在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9mL 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm/min離 心 3-5 分鐘，棄去上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；

③ 將細(xì)胞懸液加入到含有 6-7mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中，放入培養(yǎng)箱中豎立培養(yǎng)。

（二）細(xì)胞傳代

① 離心法：收集細(xì)胞，1000rpm條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將 細(xì)胞懸液按1：2 的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。

② 半量換液法：可選用半換液方式，將T25瓶子豎起來，輕輕拍打兩下，在培養(yǎng)箱靜置10分鐘，肉眼可見大部分細(xì)胞沉在底部，輕輕吸去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。

③ 注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達到大于2×10?個/mL 時，重復(fù)傳代操作或者凍存。