

其它名稱: SF9;SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9
產(chǎn)品編號: CL-063e
價格: ¥2500
SF9 昆蟲卵巢細胞
產(chǎn)品編號:CL-063e
一、細胞簡介
Sf9細胞是源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,可以用于復制桿狀病毒表達載體。
二、細胞特性
來源:蛹 卵巢
形態(tài):圓形,半貼壁半懸浮混合生長
含量:>1x10?cells
規(guī)格:T25瓶x1(常溫運輸)/ 含有1mL細胞懸液的凍存管x2(干冰運輸)
用途:本產(chǎn)品僅供實驗室研究使用,不可用于動物或人類治療或診斷用途
注意:無二氧化碳培養(yǎng)(可將 T25 瓶蓋擰緊培養(yǎng)),不需要消化,用刮刀刮。
三、完全培養(yǎng)基及凍存液配制
1) 該細胞完全培養(yǎng)基為:Grace′s Insect Medium + 10%FBS + 1%P/S。
2) 培養(yǎng)環(huán)境:28℃;無二氧化碳培養(yǎng)
3) 凍存液:推薦使用非程序無血清細胞凍存液(貨號:RC-0102)
四、收貨注意事項
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液體溢出及細胞有污染,凍存細胞若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,請拍照后及時與我們聯(lián)系。
2) 75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 對于半貼壁生長細胞:①靜置后顯微鏡下觀察細胞生長情況,若細胞密度未超過80%,可收集T25瓶中的懸浮細胞,離心后用完全培養(yǎng)基重懸打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。②若細胞密度超過80%,可進行傳代處理,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞。首次傳代,建議 1:2 傳代(兩個T25)。
細胞培養(yǎng)操作說明
一、細胞復蘇
1. 將含有1mL細胞懸液的凍存管快速放入37℃水浴中解凍,輕輕搖晃加速溶解,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%酒精擦拭凍存管外壁。
2. 將凍存管內(nèi)容物加入到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,1000rpm離心5min。
3. 棄去上清液,補加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻,接種于T25培養(yǎng)瓶中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
4. 第二天換液并檢查細胞密度。
注意:在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和佩戴防護面罩,避免凍存管爆炸造成人員傷害。
二、細胞傳代:細胞密度達80%~90%,即可進行傳代
1. 用刮刀將貼壁細胞輕輕刮下來,連同培養(yǎng)基吸至離心管中,在 1000RPM 條件下離心5-8min,棄去上清液。
2. 將懸浮細胞和貼壁細胞收集到的細胞沉淀,加 1-2mL 完全培養(yǎng)基吹打混勻。
3. 按5-6mL/瓶補加完全培養(yǎng)基,將細胞懸液按 1:2 ~ 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
三、細胞凍存
收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。步驟如下:
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/mL。
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清,用細胞凍存液重懸細胞,按每1mL凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/mL分配到一個凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞放入-80℃冰箱中,24h后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項:
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全柜內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
地址:湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷三路778號
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郵箱:service@51cells.cn
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