SNL 76/7 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào)：CL-172m

細(xì)胞特性

來(lái)源：小鼠，胚胎

形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣，短梭形，不規(guī)則形，邊緣整齊，單層貼壁生長(zhǎng)

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25x1瓶（常溫運(yùn)輸）/ 2mL凍存管x2支（干冰運(yùn)輸）

用途：僅供科研使用

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

收貨須知

收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常，請(qǐng)?jiān)?/span>24小時(shí)內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服，逾期視為收貨良好!

凍存管形式：收貨后及時(shí)置于-80℃冰箱保存，若長(zhǎng)時(shí)間不使用，應(yīng)過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮。復(fù)蘇時(shí)每管一次用完不得留存；

T25形式：收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h，然后再對(duì)細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)操作。復(fù)蘇時(shí)每管一次用完不得留存，復(fù)蘇后傳一代，即可正常使用。請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明操作，否則造成細(xì)胞失活等情形，不予提供補(bǔ)發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）細(xì)胞復(fù)蘇

①　新制100mm平皿1個(gè)，含12mL上述培養(yǎng)液；

②　凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復(fù)蘇；

③　用無(wú)菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時(shí)針搖勻；

④　放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過(guò)夜換液，2-4天長(zhǎng)滿(mǎn)。

（二）細(xì)胞傳代

將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1.5min取出。傳代用6mL培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可1:3傳代；凍存則用3mL凍存液（50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。