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用于人源iPSC/ESC誘導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞再分化至神經(jīng)元
其它名稱:
產(chǎn)品編號(hào): YD-DRY0105
價(jià)格: ¥4680
貨號(hào):YD-DRY0105
規(guī)格:1 KIT
儲(chǔ)存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基2~8℃,添加劑-80~-20℃;混勻后2~8℃,4周內(nèi)使用完畢。
產(chǎn)品內(nèi)容:
名稱 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
人神經(jīng)元分化接種基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 50mL | 1 瓶 |
人神經(jīng)元分化接種添加劑 | 1mL | 1 瓶 |
人神經(jīng)元分化維持基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 250mL | 1 瓶 |
人神經(jīng)元分化維持添加劑 | 5mL | 1 瓶 |
人神經(jīng)干細(xì)胞(貼壁培養(yǎng))消化液 | 50mL | 1 瓶 |
人神經(jīng)元分化鋪底工作液 | 20mL | 1 瓶 |
神經(jīng)元分化:
1. 提前一天用人神經(jīng)元分化鋪底工作液包備培養(yǎng)皿,放置于37℃恒溫二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中過(guò)夜。
12 孔板 | 6 孔板 | |
鋪底工作液 | 0.5-1mL | 1-2mL |
2. 顯微鏡下觀察,選擇狀態(tài)較好的貼壁神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行分化。
3. 室溫平衡人神經(jīng)元分化接種完全培養(yǎng)基。
4. 吸去培養(yǎng)皿中上清液,加入無(wú)鈣鎂的PBS清洗培養(yǎng)皿。
5. 棄上清,加入人貼壁神經(jīng)干細(xì)胞(貼壁)消化液,37℃培養(yǎng)箱消化5-15分鐘,細(xì)胞變圓時(shí)可終止消化。
6. 取出培養(yǎng)皿,加入等體積神經(jīng)元分化接種完全培養(yǎng)基終止消化,用移液器將貼壁細(xì)胞吹打下來(lái), 收集于15m離心管中。
7. 1000rpm離心5分鐘。
8. 棄上清,在離心管中加入適量神經(jīng)元分化接種完全培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞按細(xì)胞貼壁后5-10%匯合度接種(如圖所示)。
9. 37℃恒溫二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
10. 顯微鏡下觀察細(xì)胞貼壁,棄上清,更換為神經(jīng)元分化維持培養(yǎng)基。
11. 37℃恒溫二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),每 3 天更換神經(jīng)元分化維持培養(yǎng)液一次。
12. 大約培養(yǎng) 8~10 天左右,顯微鏡下可觀察到神經(jīng)元細(xì)胞。
13. 長(zhǎng)期培養(yǎng)可得到成熟神經(jīng)元。
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