

其它名稱: Jeko-1; JEKO-1; JeKo 1; Jeko1; JEKO1; JEKO
產(chǎn)品編號: CL-633h
價格: ¥1800
Jeko-1 人套細胞淋巴瘤細胞
產(chǎn)品編號:CL-633h
細胞介紹
一位套細胞淋巴瘤患者的巨細胞變種顯示白血病轉(zhuǎn)變,從其外周血單核細胞出發(fā)建立了MCL細胞株JeKo-1。 JeKo-1細胞EB病毒陰性,并表達一種B細胞表型的IgM。 細胞過表達cyclin D1, Bcl-2, c-Myc 及 Rb 蛋白。 Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR證實。 JeKo-1細胞在SCID小鼠中高成瘤。
細胞特性
來源:外周血 組織: 套細胞淋巴瘤
形態(tài):淋巴母細胞,懸浮生長
含量:>1x10?cells
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
用途:僅供科研使用
細胞運輸、保存及注意事項
復(fù)蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇 |
注意事項 | ① 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們; ② 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照,10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù); ③ 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基); ④ 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
完全培養(yǎng)基 | RPMI-1640 培養(yǎng)基+優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10% +雙抗,1% |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37℃;培養(yǎng)箱濕度為70%-80% |
凍存液 | 90%血清 + 10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配 |
細胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作
(一)凍存細胞的復(fù)蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,1000rpm/min離心3~5min,棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細胞后,均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中,置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況。
注意:建議復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
(二)細胞傳代(建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1:2比例傳代)
① 待細胞密度達到80%~90%時,即可進行傳代培養(yǎng)。
② 懸浮狀態(tài)下生長的細胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細胞對密度要求不同)可以維持細胞的正常生長。
③ 如需分瓶可以將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min離心5min,棄去上清液。向細胞沉淀中加入1~2mL完全培養(yǎng)基重懸混勻細胞,將細胞懸液按1:1比例均勻鋪于2個新的培養(yǎng)瓶/皿中,添加6~8mL完全培養(yǎng)基,置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
(三)細胞凍存
① 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度,一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml。
② 1000rpm離心3-5min,去掉上清,用配制好的細胞凍存液重懸細胞,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
③ 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80℃冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項:
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
地址:湖北省武漢市東湖高新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷三路778號
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郵箱:service@51cells.cn
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