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其它名稱： EpH4-Ev; Eph4-Empty vector
產(chǎn)品編號： CL-153m
價格： ￥3000
產(chǎn)品編號：CL-153m
細胞特性
含量：>1x106cells；
生長特性：貼壁生長；
細胞形態(tài)：上皮細胞樣，多角形
規(guī)格：T25瓶或者2mL凍存管包裝；
用途：僅供科研使用。
細胞運輸、保存及注意事項
復蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養(yǎng)瓶 | 2mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇 |
注意事項 | ① 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們； ② 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照，10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)； ③ 貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在運輸過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中），加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收； ④ 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。 | |
培養(yǎng)條件
完全培養(yǎng)基 | 90%DMEM-H+10%FBS（DMEM-H：DMEM 高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉） |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)溫度37℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣； |
凍存液 | 50%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO |
細胞復蘇、傳代、凍存操作
（一）細胞復蘇
① 新制 100mm 平皿 1個，含 12mL 上述培養(yǎng)液；
② 凍存管從液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入安全柜復蘇；
③ 用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，順時針搖勻；
④ 放入（37℃，5%CO2）培養(yǎng)箱中，過夜換液，2-4天長滿。
注意：建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
（二）細胞傳代
將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用6mL培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可1:2傳代。
（三）細胞凍存:
凍存則用3mL凍存液（50%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。
注意事項
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
地址：湖北省武漢市東湖高新技術開發(fā)區(qū)光谷三路778號
自貿生物創(chuàng)新港9層
郵箱：service@51cells.cn
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