FO 小鼠骨髓瘤細胞

產(chǎn)品編號：CL-152m

細胞特性

含量：>1x106cells；

生長特性：半懸浮半貼壁生長；

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣，圓形；

規(guī)格：T25瓶或者2mL凍存管包裝；

用途：僅供科研使用。

細胞運輸、保存及注意事項

 培養(yǎng)條件

細胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）凍存細胞的復(fù)蘇

① 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細胞后，均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況。

② 細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意：建議復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）該細胞輕微貼壁和懸浮培養(yǎng)的細胞，傳代可以參考以下方法：

①　收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

②　加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

③ 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

（三）細胞凍存

①　細胞凍存時，步驟同細胞傳代的①~④，細胞計數(shù)后，加入配制好的細胞凍存液，重懸細胞，按照1×106 ~ 1×107個細胞/mL分配到一個凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

②　將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項：

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

該細胞系是用仙臺病毒將SP１/0骨髓瘤細胞自身融合而成的細胞系。 這株細胞能抗8-氮雜鳥嘌呤，不產(chǎn)生免疫球蛋白。 通常用作Ｂ細胞雜交瘤的融合對象。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。