NCI-H522 人非小細(xì)胞肺癌腺癌細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào)：CL-538h

細(xì)胞介紹

      該細(xì)胞系是由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事從一名58歲白色男性吸煙肺癌患者治療前獲得的。 這是一種亞三倍體人類細(xì)胞系，其模態(tài)染色體數(shù)出現(xiàn)在 68% 的計(jì)數(shù)細(xì)胞中。多倍體細(xì)胞發(fā)生率為 3.0%；所有細(xì)胞共有 11 條標(biāo)記染色體，其中兩條是配對的。標(biāo)記包括：der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、配對 der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1) 和 der( 16)t(16;?)(q24;?) 和其他六個(gè)；正常 Y、N13、N15 和 N16 不存在；X染色體大多是成對的。這些細(xì)胞攜帶 TP53 基因密碼子 191 的突變。細(xì)胞不能合成肽神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白 B (NMB) 或胃泌素釋放肽 (GRP)。細(xì)胞對角蛋白和波形蛋白染色呈陽性，但對神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白呈陰性。

細(xì)胞特性

來源：肺  腺癌；非小細(xì)胞肺癌；第二階段   

形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，多角形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長，有空泡

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用

細(xì)胞運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)

 培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

注意：建議復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）細(xì)胞傳代（建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1：2比例傳代）

①　待細(xì)胞密度達(dá)到70%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

②　該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞，該細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟替代胰酶來對細(xì)胞進(jìn)行處理。用無菌細(xì)胞刮鏟刮拭細(xì)胞附著培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落，收集細(xì)胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)。收貨后第一次傳代1:2進(jìn)行，后續(xù)可以根據(jù)實(shí)際的情況以1:2~1:4的比例進(jìn)行傳代

（三）細(xì)胞凍存

①　細(xì)胞凍存時(shí)，步驟同細(xì)胞傳代的①~④，細(xì)胞計(jì)數(shù)后，加入配制好的細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，按照1×106 ~ 1×107個(gè)細(xì)胞/mL分配到一個(gè)凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

②　將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng)：

所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。