SNU-398 人肝癌細胞

產(chǎn)品編號：CL-522h

細胞介紹

      SNU-398 于 1990 年由 J.-G. Park 及其同事取自一名韓國患者的間變性肝細胞癌，該患者已通過脂質(zhì)體加多柔比星和絲裂霉素-C 的組合進行了經(jīng)導(dǎo)管動脈栓塞治療。既可以附著細胞也可以懸浮細胞。懸浮的細胞是可行的，不應(yīng)丟棄。通過溫和離心 (125 xg) 回收懸浮細胞，以與貼壁細胞群一起進行繼代培養(yǎng)。

細胞特性

來源：人，肝組織

形態(tài)：上皮樣，多數(shù)貼壁少量懸浮，

含量：>1x10?cells

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用

細胞運輸、保存及注意事項

 培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備

細胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

（一）凍存細胞的復(fù)蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細胞后，均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況。

注意：建議復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）細胞傳代（建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1：2比例傳代）

①　待細胞密度達到70%~90%時，即可進行傳代培養(yǎng)。

②　該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，該細胞用細胞刮鏟替代胰酶來對細胞進行處理。用無菌細胞刮鏟刮拭細胞附著培養(yǎng)表面將細胞刮落，收集細胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內(nèi)。收貨后第一次傳代1:2進行，后續(xù)可以根據(jù)實際的情況以1:2~1:4的比例進行傳代

（三）細胞凍存

①　細胞凍存時，步驟同細胞傳代的①~④，細胞計數(shù)后，加入配制好的細胞凍存液，重懸細胞，按照1×10⁶ ~ 1×10⁷個細胞/mL分配到一個凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

②　將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項：

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。