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產(chǎn)品中心

HL-60人早幼粒白血病細(xì)胞

其它名稱: HL 60; HL.60; HL60; Human Leukemia-60

產(chǎn)品編號(hào): CL-183h

價(jià)格: ¥1800

規(guī)格:
1×10?cells
數(shù)量: - +

詳細(xì)介紹

HL-60人早幼粒白血病細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào):CL-183h

細(xì)胞描述

HL-60是一株早幼粒細(xì)胞。外周血白細(xì)胞來自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進(jìn)分化。細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對(duì)趨化刺激有響應(yīng)。致癌基因myc表達(dá)陽(yáng)性。

細(xì)胞特性

來源:外周血;早幼粒細(xì)胞;急性粒-單核細(xì)胞白血病

形態(tài):原粒細(xì)胞,懸浮生長(zhǎng)

含量:>1x10?cells

規(guī)格:T25x1常溫運(yùn)輸/ 2mL凍存管x2干冰運(yùn)輸

用途:僅供科研使用

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

完全培養(yǎng)基

IMDM,79%

優(yōu)質(zhì)胎牛血清,20%

雙抗,1% 

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣5%二氧化碳;溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

凍存

90%血清 + 10%DMSO現(xiàn)用現(xiàn)配

細(xì)胞接收注意事項(xiàng)

收貨當(dāng)天發(fā)現(xiàn)異常,請(qǐng)?jiān)?/span>24小時(shí)內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服,逾期視為收貨良好!

凍存管形式:收貨后及時(shí)置于-80℃冰箱保存,若長(zhǎng)時(shí)間不使用,應(yīng)過夜轉(zhuǎn)移至液氮。復(fù)蘇時(shí)每管一次用完不得留存;

T25形式:①收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-3h(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100x,200x各一張,觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況),以此做為收貨依據(jù);②細(xì)胞靜置后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞,1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。③運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

 

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存操作

(一)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

(二)細(xì)胞傳代

待細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代培養(yǎng):

懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個(gè)/mL(不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同)可以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中,1000rpm 離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行

(三)細(xì)胞凍存

收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例

① 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/mL;

② 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1mL凍存液含1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/mL分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息;

③ 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用

注意事項(xiàng):

① 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

② 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏,并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。


服務(wù)熱線:400-027-5700

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